Bij het omgaan met micro-organismen is het belangrijk om op de juiste manier aseptische technieken toe te passen - zowel om te voorkomen dat uw micro-organismen besmet raken door invloeden van buitenaf, als om uzelf en de mensen om u heen te beschermen.
Stappen
Stap 1. Bescherm uzelf
Bind lang haar vast en draag een laboratoriumjas en een veiligheidsbril.
Stap 2. Was je handen en je werkruimte
Was uw handen met water en zeep en spuit de bank af met 70% ethanol.
Stap 3. Leg al je apparatuur neer
Zorg ervoor dat je alles klaar hebt staan voordat je begint.
Stap 4. Zet de bunsenbrander zo hoog mogelijk aan
Je hebt het nodig om je apparatuur te steriliseren, en de opwaartse tocht voorkomt dat verontreinigingen van buitenaf op je cultuur terechtkomen.
Draai de kraag zodat de luchtstroom helemaal open is
Stap 5. Steriliseer de inentingslus
Houd het in een hoek van ongeveer 45° naar beneden en beweeg het langzaam door de vlam zodat het rood-wit heet gloeit.
- Het is het gemakkelijkst om de lus tussen uw duim en wijsvinger vast te houden en deze met uw middelvinger te ondersteunen.
- Het heetste deel van de vlam bevindt zich precies op het puntje van de binnenste, blauwe vuurkegel.
Stap 6. Gebruik je andere hand om je oorspronkelijke cultuur te grijpen
- Als het een bord is, houd het dan vast en draai het deksel net genoeg open om de lus erin te krijgen.
- Als het een buis met een deksel is, gebruik dan de pinkvinger van de hand waarmee u de entlus vasthoudt om het deksel te verwijderen en sleep vervolgens de opening van de buis twee keer snel door de vlam van de bunsenbrander. Dit wordt vlammen genoemd en doodt alles wat in de buis wil komen, en creëert een convectiestroom die lucht uit de buis dwingt, zodat niets het kan krijgen. Blijf met je pink het deksel vasthouden voor de volgende stap.
Stap 7. Enten
Raak de inentingslus aan op een kolonie die je wilt oppakken. Als u ent vanuit vloeibare bouillon, dompel dan de inentingslus in de buis en schud de lus om ervoor te zorgen dat u voldoende bacteriën krijgt.
Stap 8. Sluit de oorspronkelijke cultuur
Als het een bord is, sluit je het deksel en zet je het weer neer. Als het een buis is, sleep je de opening twee keer door de vlam van de bunsenbrander en plaats je de deksel er weer op.
Stap 9. Open de nieuwe plaat
Gebruik zoals eerder uw vrije hand om het deksel net ver genoeg open te draaien om de lus erin te krijgen
Stap 10. Plaat de bacteriën
Veeg de inentingslus lichtjes over het oppervlak en zorg ervoor dat u de agar niet binnendringt.
Een veelvoorkomend streeppatroon is de kwadrantmethode
Stap 11. Sluit de plaat
Stap 12. Steriliseer de inentingslus
Houd het zoals eerder in een neerwaartse hoek van 45° en beweeg het langzaam door de vlam zodat het rood-wit heet wordt.
Tips
- Handschoenen zijn over het algemeen niet nodig. Alle bovenstaande stappen dienen ter bescherming van zowel uzelf als uw bacteriën, waardoor de kans op besmetting zeer laag is. Handschoenen kunnen vervelende brandwonden veroorzaken als je ze per ongeluk aanraakt met de hete inentingslus.
- Houd er rekening mee dat je met vuur werkt. Het is niet erg, maar zorg ervoor dat je weet wat je moet doen als je jezelf verbrandt; pauzeer het experiment, spoel de brandwond af met water en verwittig zo nodig je leidinggevende.
- Als je meerdere runs doet en aseptische techniek moet gebruiken, is het niet nodig om de bunsenbrander tussen de runs volledig uit te zetten - draai hem gewoon naar de waakvlam en zet hem pas helemaal uit als je helemaal klaar bent.
